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1、(質粒DNA轉化)細菌材料量=培養液的體積(ml)×細胞密度(OD600)。
2、比如1.5ml OD600為2的細菌材料量是3.0,使用的最大細菌材料量是4.0。
3、大于4.0的細菌材料量會使裂解物澄清板堵塞,使質粒DNA的得率和質量降低,最小的細菌材料量是1.0。
4、在菌株與菌株之間,OD600值和每毫升中活細胞數間的關系變化很大,因此有必要通過測量特定大腸桿菌菌株的生長增減物在生長周期的不同時相的OD600值,并將各濃度的增減物鋪于無抗生素的LB瓊脂平皿以計算每一時相的活細胞數,從而使分光光度讀數得到標化。
5、擴展資料:注意事項分光光度計要測量的樣品必須是均一的溶液,不能有沉淀,如果有沉淀的話就要搖勻。
6、為了保證正確操作,必須針對每種微生物和每臺儀器用顯微鏡進行細胞計數,做出校正曲線。
7、實驗中偶爾會出現菌液的OD值出現負值,原因是采用了顯色的培養基,即細菌培養一段時間后,與培養基反應,發生變色反應。
8、另外,需要注意的是,測試的樣品不能離心,保持細菌懸浮狀態。
9、注意,一般來說樣品的吸光度值在0.1-1.5Abs之間可以保證儀器的準度和測量結果的線性關系。
10、對于濃度過度的樣品建議稀釋后再進行測定。
11、參考資料:百度百科-OD600。
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